Диагностировать Chlamydia trachomatis - не просто. Даже такой современный метод, как Полимеразная Цепная Реакция может быть бессильным. Это происходит по тому, что бактерия при неправильном лечении или при скрытом длительном течении, значительно уменьшаются в количестве, закрываться (капсулироваться) специальными оболочками. Это так называемые - персистирующие формы, которых выявить очень сложно.
ПЦР анализ на хламидии (хламидиоз)
– выявляет ДНК возбудителя с точностью 95-97% – это золотой стандарт.
Ответ может быть качественный - да или нет; полуколичественный и количественный. Это очень важно для отслеживания лечебного процесса. Благодаря этому врач понимает, на сколько болезнь поддаются терапии.
Посев на хламидию
Выявляемость – 85-90%. Выполняется с определением чувствительности к антибактериальным препаратам.
ИФА
Не выявляет возбудителя хламидиоза, а обнаруживают исключительно антитела к нему в крови. Это вспомогательная, второстепенная методика.
В арсенале наших врачей есть самый современный метод! Точность – 98-99%.
Выполняется тогда, когда другие способы бессильны!
Преимущества:
- чувствительность к Chlamydia trachomatis 99-100%;
- применяемый в самых сложных хронических вариантах, когда другие способы дают отрицательный результат;
- применяется при персистенции болезни;
- позволяет выполнить контроль, не через три недели, как это требует ПЦР диагностика, а на следующий день после приема последней таблетки курса.
ПЦР-анализ – один из наиболее эффективных методик при диагностике хламидиоза. Это инфекционное заболевание тяжело поддается выявлению. Оно часто протекает бессимптомно, в иных случаях – симптомы недуга смазаны, имеют сходство с массой других патологий. Тем не менее, хламидиоз чреват тяжелыми осложнениями, которые могут проявиться через несколько лет после заражения. У мужчин часто выявляют простатит, у женщин – бесплодие, эрозию шейки матки и воспаление органов малого таза. По этой причине своевременная и точная диагностика хламидиоза крайне важна.
Что такое ПЦР-анализ, как проходит и в каких случаях назначается?
Материал для этого исследования может быть взят непосредственно из очага инфекции, при хламидийной инфекции к таковым относятся:
- влагалище;
- шейка матки;
- уретра;
- сперма;
- секрет простаты.
Также для ПЦР-исследования может быть взята моча или кровь.
В ходе исследования выделяются участки ДНК и РНК искомых болезнетворных микроорганизмов, которые вступают в специфическую полимеразную реакцию, что вызывает их бурный рост и развитие, что и облегчает их обнаружение.
Это абсолютно безболезненная методика, которая не требует особой подготовки от пациентов. С другой стороны и от медиков она не требует значительных усилий: в течение двух-трех дней после забора анализов можно получить достоверную информацию о наличии или отсутствии микроорганизмов хламидия трахоматис у больного.
ПЦР способен выявить присутствие даже единичных хламидий в анализах. В ходе исследования создаются специальные условия для роста и развития ДНК хламидий в отобранном материале – это полимеразная реакция, цепной химический процесс дал название самому методу. Затем к пробе добавляются специальные аналитические маркеры, которые указывают на наличие либо отсутствие ДНК хламидий в образце.
В большинстве случаев данный способ исследования назначается:
- во время беременности;
- при обнаружении хламидиоза у полового партнера;
- при бесплодии с не выявленной причиной;
- при проявлении симптоматики хламидиоза.
Помимо хламидиоза ПЦР назначают при подозрении на следующие заболевания:
На сегодняшний момент практически всем беременным женщинам рекомендовано ПЦР исследование на хламидиоз. Почему так происходит? Хламидиоз – опасное заболевание, которое может передаваться от матери ребенку во время физиологических родов. В то же время хламидиоз протекает во многих случаях бессимптомно, по этой причине беременная может даже не подозревать о наличии у себя подобной инфекции.
Если в мазке беременной будет обнаружена хламидийная инфекция, женщине потребуется довольно длительное лечение, которое требует использование антибиотиков. Тем не менее, в арсенале современных докторов имеется достаточное количество эффективных и безопасных для матери и ребенка препаратов. О том, как сдавать ПЦР на хламидиоз во время вынашивания ребенка подробно расскажет доктор, который ведет беременность.
Несмотря на все неоспоримые достоинства этого метода, все же и у него имеется ряд существенных минусов:
Как подготовиться к анализу правильно и как расшифровать результаты анализов?
Данный вид исследования не требует особых мер подготовки, забор материала проходит быстро и безболезненно. Однако соблюдение несложных правил поможет получить достоверный результат анализа. Вот эти несложные меры подготовки к ПЦР-исследованию:
Если же для анализа требуется сдать кровь, следуйте таким правилам:
- кровь на ПЦР сдают натощак: перед забором биологического материала нельзя есть, в том числе и жевать жевательную резинку, также нельзя пить даже воду;
- за сутки до анализа желательно исключить из рациона жирную и жареную пищу;
- также необходимо отказаться от приема любых лекарственных средств, разумеется, если таковые не являются жизненно важными.
Для анализа может потребоваться моча, ее собирают следующим способом:
Нарушение этих правил может привести к ложноотрицательному результату исследования, что в свою очередь усложнит назначение лечения и может привести к развитию осложнений.
Поставить правильный диагноз и назначить адекватное лечение при хламидиозе сможет только профессиональный доктор, однако понять в общих чертах результаты анализа может человек без медицинского образования. Частные клиники в большинстве случаев не дают комментарии по обнаруженным показателям.
«Отрицательный» результат говорит об отсутствии искомого микроорганизма в предоставленном материале для исследования. Однако ПЦР анализ – не истина в последней инстанции. Если у пациента присутствуют явные признаки хламидиоза при «чистых» анализах, это повод для повторного обследования с подключением других методов.
«Положительный» ответ говорит о наличии того или иного возбудителя в предоставленной пробе. Однако и это не всегда подтверждает наличие инфекционного процесса. ПЦР анализ дает качественное отображение состава микрофлоры, что может быть неверно истолковано.
Так, например, некоторые бактерии и прочие микроорганизмы могут в небольшом количестве постоянно присутствовать в микрофлоре влагалища, не вызывая при этом воспаления. Развитие заболевания может вызвать резкое увеличение количества этих микроорганизмов. То есть значение имеет не только наличие тех или иных микроорганизмов, но и их количество.
Хламидиоз – заболевание, которое трудно диагностировать, еще сложнее вылечить. Для выявления недуга необходимо подключение самых современных и эффективных методов, к которым относится ПЦР диагностика.
Исследование для выявления возбудителя урогенитального хламидиоза (Chlamydia trachomatis), в ходе которого с помощью метода полимеразной цепной реакции в реальном времени (РТ-ПЦР) определяется генетический материал (ДНК) хламидий в образце биоматериала.
Синонимы русские
Хламидия, возбудитель хламидиоза.
Синонимы английские
Ch. trachomatis, DNA (qPCR, Real-time PCR, RT-PCR), Chlamydia trachomatis by Amplified Detection.
Метод исследования
Полимеразная цепная реакция (ПЦР) в режиме реального времени.
Какой биоматериал можно использовать для исследования?
Отделяемое конъюнктивы, секрет простаты, первую порцию утренней мочи, соскоб из прямой кишки, синовиальную жидкость, соскоб урогенитальный, эякулят, мазок из зева (ротоглотки).
Общая информация об исследовании
Инкубационный период составляет от 2 недель до 1 месяца. Часто (примерно в половине случаев) хламидиоз протекает бессимптомно.
Начальные симптомы инфекции: жжение и боль при мочеиспускании, слизистые выделения, помутнение мочи, слабость, немного повышенная температура, у мужчин – воспаление мочеиспускательного канала, которое длится долгое время, у женщин – слизистые или гнойные выделения из влагалища. В дальнейшем могут возникать различные осложнения: эпидидимит, эндометрит, конъюнктивит, артрит и др.
Считается, что хламидийная инфекция опасна при беременности, так как может привести к преждевременным родам, выкидышу, сниженному весу новорождённых и даже гибели плода.
Кроме того, новорождённый ребенок иногда заражается хламидиозом от матери при прохождении через родовой канал, из-за чего у него развивается конъюнктивит либо пневмония.
Для анализа на хламидии и диагностики хламидиоза применяют серологические методы (например, ИФА), посев хламидий, а также выявление ДНК бактерий (например, ПЦР).
У серологических методов и посева есть ряд ограничений, так что тесты на основе ПЦР считаются самыми удобными и чувствительными.
ПЦР в реальном времени (РТ-ПЦР) – это лабораторный метод, который позволяет найти в пробе ДНК возбудителя: если в образце присутствует Chlamydia trachomatis , то реал-тайм ПЦР обнаружит ДНК этой бактерии. Принцип заключается в том, что ДНК возбудителя, которого хотят выявить, много раз копируется с помощью специальных ферментов (ДНК-полимераз). Обычно проходит несколько десятков циклов и в ходе каждого нужная ДНК удваивается. В результате количество исследуемой ДНК увеличивается в миллионы раз и ее можно детектировать с помощью флуоресцентного красителя.
При ПЦР в реальном времени количество ДНК выявляется в процессе копирования, после каждого цикла. Но при этом с помощью РТ-ПЦР нельзя различить формы инфекции (например, свежеприобретенное или давнее заражение).
Для чего используется ПЦР-анализ на хламидии?
- Для диагностики инфекции, вызванной Chlamydia trachomatis (хламидия трахоматис), и мониторинга ее лечения.
Когда назначается исследование?
- Для диагностики урогенитального хламидиоза при следующих симптамах:
- жжение и боль при мочеиспускании,
- покраснение в области наружного отверстия уретры у мужчин,
- слизистые выделения из половых путей,
- помутнение мочи,
- слабость,
- субфебрильная температура.
- Для исключения хламидиоза при планировании беременности (и во время нее).
- После случайных половых контактов.
- Если половой партнер заражен хламидиями.
Что означают результаты?
Референсные значения: отрицательно.
Отрицательный результат
- Хламидийная инфекция отсутствует.Воспаление вызвано другим возбудителем.
Положительный результат
- Хламидийная инфекция присутствует.Если есть воспаление, то оно, вероятно, вызвано хламидиями. В этом случае содержание ДНК в пробе высокое.
- Хламидии присутствуют, однако воспаление может быть вызвано другим возбудителем. В этом случае ДНК хламидий выявлена в небольшом количестве.
- Посев на Chlamydia trachomatis
- Посев на Chlamydia trachomatis с определением чувствительности к антибиотикам
Кто назначает исследование?
Врач общей практики, терапевт, инфекционист, гинеколог.
Литература
- Goldman"s Cecil Medicine. 24 th ed. Goldman L, Schafer A.I., eds. Saunders Elsevier; 2011.
- Howie S. E. Chlamydia trachomatis infection during pregnancy: known unknowns. Discov Med. 2011; 12(62): 57 – 64.
Описание
Метод определения ПЦР с детекцией в режиме «реального времени».
Исследуемый материал Моча
Определение ДНК Chlamydia trachomatis в моче методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) с детекцией в режиме «реального времени».
Особенности жизненного цикла Chlamydia trachomatis приводят к частому возникновению персистирующей формы инфекции, резистентности к терапии. Реактивация инфекции может произойти под действием изменения иммунного или гормонального статуса, травмы, операции, стресса. У Chlamydia trachomatis низкая иммуногенность, вследствие чего у 50% инфицированных антитела не обнаруживаются. Поэтому (особенно в сомнительных случаях, при отсутствии сероконверсии) микроорганизм выявляют высокочувствительным и специфичным прямым методом - ПЦР.
Аналитические показатели: для выявления ДНК С.trachomatis в клинических образцах методом полимеразной цепной реакции (ПЦР):
- определяемый фрагмент - специфичный участок ДНК Chlamydia trachomatis;
- специфичность обнаружения - 100%;
- чувствительность анализа - 100 копий ДНК Chlamydia trachomatis в образце.
Подготовка
Следует собирать первую утреннюю порцию мочи в количестве 20-30 мл в стерильный флакон. Не рекомендуется взятие биоматериала на фоне проведения антибактериальной терапии.
Показания к назначению
- Острая фаза заболевания.
- Установление этиологии хронического инфекционного процесса урогенитального тракта, в т. ч. его верхних отделов, возможность обнаружить единичные молекулы ДНК клетки хламидий, не выявляемые другими методами.
- Беременность с отягощённым акушерским анамнезом.
- Бесплодие.
- Контроль эффективности терапии (не ранее чем через месяц после окончания приёма антибактериальных препаратов).
- Профилактические скрининговые исследования (для исключения вероятности бессимптомного течения инфекции).
Интерпретация результатов
Интерпретация результатов исследований содержит информацию для лечащего врача и не является диагнозом. Информацию из этого раздела нельзя использовать для самодиагностики и самолечения. Точный диагноз ставит врач, используя как результаты данного обследования, так и нужную информацию из других источников: анамнеза, результатов других обследований и т.д.
Тест качественный. Результат выдаётся в терминах «обнаружено» или «не обнаружено».
- «обнаружено»:в анализируемом образце биологического материала найден фрагмент ДНК, специфичный для Chlamydia trachomatis; инфицирование Chlamydia trachomatis;
- «не обнаружено»:в анализируемом образце биологического материала не найдено фрагментов ДНК, специфичных для Chlamydia trachomatis или концентрация возбудителя в образце ниже границы чувствительности теста.
Обращаем внимание, что сроки выполнения ПЦР-исследований могут быть увеличены при проведении подтверждающих тестов.
Урогенитальные хламидии относятся к инфекциям бактериального происхождения, механизмом передачи которых считается половой. Анализ ПЦР на хламидии позволяет выявить их присутствие в человеческом организме. Необходимо заметить, что хламидии относятся к группе распространенных возбудителей инфекций у человека.
Хламидиоз относится к венерическим заболеваниям, которые передаются половым путем и представляют немалую опасность для здоровья человека. Причиной хламидиоза считают внутриклеточных микроорганизмов – хламидий.
Заболевание встречается не только у людей, но и у животных. Например, у кошек, больных на хламидиоз, происходит формирование проблем с глазами, пищеварительным трактом и легкими. Для уточнения диагноза рекомендуется провести сдачу анализа для исследования методом ИФА или ПЦР.
В наше время среди мужчин и женщин чаще всего выявляют генитальную форму болезни. Хламидии обладают способностью повреждать эпителий половых органов, что приводит к формированию осложнений в виде заболеваний мочеполовой системы.
Достаточно часто инфекционный процесс приводит к появлению:
- воспаления уретры;
- эндоцервицита;
- артрита;
- бесплодия;
- патологических процессов во время вынашивания ребенка.
Если возбудитель заболевания атакует мужчин, то у них может развиваться:
- простатит;
- цистит;
- атрофия предстательной железы;
- эпидидимит;
- проктит.
Лечение хламидиоза должно проводиться только традиционными методами с применением антибактериальных препаратов, в противном случае эффекта наблюдаться не будет.
Что касается выявления заболевания у мужчин и женщин, то оно проводится:
- культурной методикой – осуществляется забор биологического материала на питательные среды;
- молекулярно-биологической методикой – ПЦР;
- взятием мазков на цитологическое обследование;
- серологическим исследованием или ИФА – данный способ позволяет осуществить определение наличия в сыворотке крови человека антител к возбудителю заболевания.
Теперь рассмотрим метод ПЦР-диагностики более детально.
Техника забора материала для анализа ПЦР
Диагностика хламидиоза считается задачей не из легких, ведь присутствие возбудителя невозможно обнаружить при обычном осмотре или при проведении исследования мазка на микрофлору.
У женщин мазок на хламидии методом ПЦР берут из влагалища, для этого используют специально предназначенные пластиковые зонды. После взятия материала их помещают в пробирку, содержащую транспортную среду (муколитик розового цвета). Данная пробирка стерильная, использовать ее разрешается только один раз.
Обратите внимание, что при проведении забора материала необходимо быть достаточно осторожным и избегать травматизации слизистой оболочки, ведь присутствие примесей крови в материале для исследования недопустимо.
У мужчин проводят соскоб с урогенитального канала. Головку члена протирают физиологическим раствором, проводят массаж уретры и вводят зонд в мочеиспускательный канал на 1–2 см. После этого его помещают в стерильную пробирку, которая плотно закрывается.
Процесс исследования
Метод полимеразной цепной реакции (ПЦР) относится к группе методов диагностики, которые отличаются скоростью и высоким уровнем достоверности.
Анализ на хламидии методом ПЦР считается чрезвычайно чувствительным по сравнению с другими методами диагностики, например с иммунофлюоресцентным анализом крови (ИФА), результаты которого довольно часто занижают через субъективность оценки результатов и недостаточный уровень чувствительности антигенов. Важным моментом считается то, что интерпретацию результатов должен проводить только квалифицированный специалист.
Процесс исследования состоит из:
- денатурации – при температурных показателях 94 градуса происходит замена двойной цепи ДНК, которая трансформируется в одноцепочечную;
- отжига;
- полимеризации – данная стадия характеризуется проведением синтеза новых цепей ДНК.
Достоверность анализа ПЦР на хламидии находится на высоком уровне, что объясняется отсутствием перекрестных реакций с подобными по строению микроорганизмами.
Обратите внимание, что полученные результаты в обязательном порядке должны сопоставляться с общим состоянием человека, поэтому правильную оценку результата может осуществить лишь доктор.
Правила подготовки
Перед тем как сдавать мазок ПЦР на хламидии, необходимо ознакомиться с некоторыми правилами и рекомендациями. Их выполнение позволит получить верный результат.
Важно! Забор материала не проводится у женщин во время менструального цикла. Объясняется это тем, что присутствие кровяных выделений на слизистой оболочке мешает осуществить забор материала.
Так как для проведения ПЦР-диагностики хламидиоза применяют специально предназначенные тест-системы, сдаваться мазок должен только при соблюдении определенных условий:
- исследуемая личность должна воздержаться от мочеиспускания на протяжении трех часов до момента забора материала;
- в течение трех дней до предстоящего обследования необходимо исключить из своего рациона алкоголь, воздерживаться от половых отношений, не проводить спринцеваний, не использовать вагинальных свечей и мазей;
- на протяжении двух недель до момента обследования исследуемая личность не должна принимать никаких антибактериальных препаратов.
Проведение диагностики хламидиоза считается достаточно важным моментом, ведь только сдача анализа дает возможность осуществить своевременное адекватное лечение.
Самым эффективным, точным и быстрым считается анализ на хламидии ПЦР. С его помощью проводится не только выявления инфекционных заболеваний, но и проведение контроля лечения. Тест может упростить или подтвердить результаты серологических исследований.
Интерпретация результатов
Как уже отмечалось, расшифровывать результаты проведенного исследования должен только квалифицированный врач. Результат может быть:
- отрицательным – свидетельствует об отсутствии следов инфекции () в исследуемом материале;
- положительным – подтверждение того, что исследуемый материал содержит в себе следы хламидийной инфекции.
Необходимо помнить, что полимеразная цепная реакция дает возможность увидеть качественный результат, а не количественный. При некоторых патологических процессах наличие бактерий не считается свидетельством присутствия болезни.
Подведя итог, хочется акцентировать внимание на том, что при выявлении заболевания не нужно паниковать и отчаиваться – хламидиоз успешно лечится, главное – вовремя обнаружить патологию и обратиться за помощью к доктору.
Для устранения риска заражения необходимо внимательно относиться к себе и своему здоровью, проходить регулярные профилактические осмотры, которые помогут определить наличие патологических процессов в организме.